組織包埋装置

向きが不適切だと、スライド上で組織学的特徴が無秩序に配置されてしまいます。 たとえば、皮膚の向きを決めるときは、完成したスライドで層が見えるように、上皮の端、皮下組織、およびより深い層が底部に揃うように標本を配置する必要があります。 複数の標本を包埋する場合、切断面が提出された組織の有効な表示となるように、すべての組織片を容器の底にしっかりと包埋する必要があります。

不適切な向きによるアーチファクトは、包埋手順中に頻繁に発生し、ミクロトームの損傷、切片の引き裂きにつながる可能性があり、それにより組織の顕微鏡研究が困難になります。 その結果、再埋め込みが必要となり、所要時間 (TAT) が長くなります。

パラフィンワックスは組織包埋の最も重要な要素の 1 つであり、その品質はブロックの製造の基礎となります。 パラフィンワックス配合物は、組織の歪みを最小限に抑え、優れた圧縮耐性とリボンの連続性を実現するために、一貫した品質と信頼性を備えて開発される必要があります。 パラフィンにはさまざまな設定温度、添加剤、特性があり、処理、包埋、切片化のニーズを満たすパラフィンがあります。そのため、要件を慎重に検討し、研究してください。

たとえば、一般的な組織の包埋には Paraplast Regular が推奨されます。 これは、分子量が調整されたプラスチックポリマーを含む高度に精製されたパラフィンの精製混合物で構成されています。 これにより、最小限の圧縮で組織浸潤の改善と優れた品質の切片がサポートされます。

組織検査では不純物が検出される場合もあります。 白い綿状のような不純物が現れないこと。 白い綿状の存在は、パラフィン中の過剰な透明剤を示します。 これを回避するには、パラフィンを交換する頻度を増やしてください。 その上; 顕微鏡切開中に組織をできるだけ平らにし、ブレードで均等に切断できるようにするために、ボルト状の構造材料を使用することを強くお勧めします。

それほど一般的な問題ではありませんが、病理学者または病理学助手 (PA) がさまざまなサイズの型を利用できるかどうかを知っておくことは、分析のために選択する組織のサイズを計画するために事前に理解しておくことが重要です (サンプルの厚さを参照)。処理する組織のカセットの選択に当てはまります。 一部のカセットには非常に小さな穴があり、組織ブロックを構築するために包埋媒体を通過させるのが困難です。 他のものには非常に大きな穴があり、その結果、組織の処理中に小さな組織や断片が失われる可能性があります。

組織学研究室の専門家が包埋するときに確認できるため、小さな組織は包埋されないまま放置されると失われる可能性があります。 そのため、最新の埋め込みセンターには、取り外し可能または取り外し不可能な拡大鏡が用意されています。 明るい作業エリアも重要であり、これらの埋め込みセンターや LED ライトも利用できます。

組織はさまざまな方法で受け入れられ、費用はこれらの方法に応じて調整されます。
新鮮な組織:新鮮な組織が提出された場合は、処理前に 10% 中性緩衝ホルマリンに一晩入れて固定します。
固定組織:さまざまな固定剤で固定された組織を受け入れます。 固定が完了したら、サンプルを 70% エタノールに移してください。
カセット内の固定組織:お客様は、ご希望の向きになるようにティッシュをカセットに入れていただけます。

以下はお客様が使用できるものであり、E1515 で受け取ることができます。
10% 中性緩衝ホルマリン (NBF)
カセット（有料）
生検ラップ/カセット

必要に応じて組織を固定します。固定剤が組織に浸透するまで約 1 mm/ 時間、固定剤の体積の 10-20 倍の量を組織に浸透させます。
ラベルカセット:カセットにラベルを付ける場合は、試薬抵抗マーカー (例: Statmark ペン) またはカセット用の #2 硬芯鉛筆のみを使用し、ペンやシャーピー マーカーは決して使用しないでください。 処理に使用される溶剤により、多くの「永久」シャーピー マーカーからインクが除去される可能性があります。
小さな破片が失われないようにしてください。処理中に小さな組織が失われるのを防ぐために、生検カセットに入れるか、濾紙で包みます。 組織プロセッサーは真空を使用して浸透を促進し、カセットから組織を除去します。
希望の向きでカセットに置きます。組織をカセットに入れると、カセット内に置かれた組織表面が包埋のために下に置かれ、これが最初に切片化される表面になります。 特別な埋め込みリクエストがある場合は、送信フォームに記載してください。
しっかりと蓋が閉まるスピルルーフコンテナに標本を置きます。 サンプルが乾燥しないように、すべての組織やカセットが 70% エタノールに完全に浸されていることを確認してください。
輸送コンテナにラベルを付けます。PI名、研究者名（提出者）、解決策、日付を記載してください。
サンプルと提出フォームを RHS に提供します。 標本の識別をリストするための別のシートも提供されます。

組織はさまざまな方法で受け入れられ、費用はこれらの方法に応じて調整されます。
ゆっくりと凍結するのではなく急速に凍結することで、組織内の氷結晶の形成が減少します。
新鮮な組織:新鮮な組織が提出される場合は、固定せずに急速凍結します。
固定組織:さまざまな固定剤で固定された組織を受け入れます。 一部のお客様は、凍結前にショ糖勾配を通じてサンプルを調製することを選択します。 組織が準備されたら、RHS に配送する前にサンプルを 30% スクロースに移してください。
OCT モールド内の凍結ブロック: お客様は、希望の向きを確保するために独自のサンプルを凍結することができます。 凍結したブロックは、セクショニングやさらなる処理のために RHS に提供できます。

あらかじめ標識された組織型の 3 分の 1 が OCT 包埋化合物で満たされます。
凍結する前に、組織を優しく吸い取り、余分な液体を取り除く必要があります。
組織標本は組織モールド内に配置されます（組織の端とモールドの側面の間に隙間が維持される必要があります）
組織型の残りの部分には OCT 包埋媒体が充填されます。 標本が完全に囲まれ、OCT で覆われていることを確認します。
組織型を完全に凍結するまで液体窒素バス上に浮かべます。 OCT は硬く不透明/白色になります。
液体窒素からカビを取り出し、ホイルでしっかりと包みます。
ホイルに包まれた標本をビニール袋に入れ、標本の識別名と日付を適切にラベル付けします。 PI名、研究者名（提出者）、解決策、日付を記載してください。
組織は-80℃で保管し、ドライアイス上でRHSに配送する必要があります。
サンプルと提出フォームを RHS に提供します。 標本の識別をリストするための別のシートも提供されます。