組織処理は、顕微鏡検査用の標本を準備する組織学における重要なステップです。大手組織処理装置サプライヤーとして、当社は組織処理ワークフローにおいて適切な化学物質を使用することの重要性を理解しています。このブログ投稿では、組織処理装置で使用されるさまざまな化学物質とその機能について説明します。
固定剤
固定は組織処理の最初のステップであり、その主な目的は組織を生きているような状態に保存し、自己溶解や腐敗を防ぐことです。最も一般的に使用される固定剤はホルムアルデヒドで、通常は 10% 中性緩衝ホルマリン (NBF) の形です。ホルムアルデヒドは、隣接するタンパク質のアミノ基間にメチレン架橋を形成してタンパク質を架橋します。この架橋により組織構造が安定化し、その後の処理ステップに耐えられるようになります。
もう 1 つ広く使用されている固定剤はグルタルアルデヒドです。グルタルアルデヒドは、ホルムアルデヒドに比べて強い架橋を形成するジアルデヒドです。微細な細胞構造の保存に優れているため、電子顕微鏡検査によく使用されます。ただし、グルタルアルデヒドは組織硬化を引き起こす可能性があるため、日常的な光学顕微鏡検査には最適ではない可能性があります。
ブアン液は、ピクリン酸、ホルムアルデヒド、酢酸を含む複合固定剤です。これは、優れた核の詳細を生成することで知られており、生検標本などの小さな組織片によく使用されます。ブアン液に含まれるピクリン酸は組織の硬化を促進し、酢酸は他の固定剤で発生する可能性のある収縮を防ぎます。
脱水剤
組織内の水分は、後のプロセスで使用される透明剤や包埋媒体と混和しないため、固定後は組織を脱水する必要があります。エタノールは最も一般的に使用される脱水剤です。さまざまな濃度で入手でき、通常、組織は濃度を増加させながら (例: 70%、80%、90%、95%、100%) 一連のエタノール溶液に通されます。この段階的な脱水により、組織の収縮や損傷を防ぐことができます。
イソプロパノールは脱水症状のもう一つの代替品です。エタノールと同様の特性を持ち、同様の濃度勾配で使用できます。イソプロパノールはエタノールよりも引火性が低いため、一部の実験室環境では利点となります。ただし、エタノールと比較して組織硬化がさらに進む可能性があります。
清算代理人
透明化剤は、組織から脱水剤を除去し、包埋媒体が容易に浸透できるように組織を透明にするために使用されます。キシレンは古典的な洗浄剤です。これは、最も一般的に使用される包埋媒体であるエタノールとパラフィンワックスの両方にとって優れた溶媒です。キシレンは比較的早い浄化作用を持っていますが、有毒で強い臭気があります。
トルエンは、その浄化特性においてキシレンに似ていますが、毒性は低くなります。場合によってはキシレンの代替品として使用できます。別の代替品はクロロホルムで、これは優れた浄化剤ですが、潜在的な発がん物質であるという欠点があります。
より環境に優しい選択肢をお探しの方には、柑橘類由来の天然化合物であるリモネンを洗浄剤として使用できます。リモネンは心地よい香りがあり、従来の洗浄剤よりも毒性が低いです。ただし、クリア動作が遅くなり、処理時間が長くなる可能性があります。
メディアの埋め込み
組織処理の最終ステップは、切片作成をサポートするために適切な媒体に組織を包埋することです。パラフィンワックスは最も広く使用されている包埋媒体です。切断に適した融点を持ち、通常は約 56 ～ 60°C です。パラフィンワックスは、透明化ステップ後に組織に容易に浸透することができ、薄切片作成に優れたサポートを提供します。
プラスチック樹脂は、特に電子顕微鏡検査や高解像度のイメージングが必要な場合に、包埋媒体としても使用されます。 Epon などのエポキシ樹脂は、組織構造の優れた保存を提供し、非常に薄い切片に切断することができます。 LR ホワイトのようなアクリル樹脂は水混和性があり、抗原性を損なうことがある厳しい脱水や透明化の手順を必要としないため、免疫細胞化学に使用できます。
化学ベースの処理における当社のティッシュプロセッサーの役割
当社では幅広いラインナップをご用意しておりますティッシュプロセッサーの組織学これらの化学物質の使用を効率的に処理するように設計されたソリューション。私たちの密閉型ティッシュプロセッサーには、キシレンなどの有毒化学物質を扱う際に適切な換気と安全性を確保するための高度な技術が装備されています。密閉型の設計により、実験室職員が有害なガスにさらされるのを最小限に抑えることができます。
私たちの病理組織学における自動組織プロセッサー組織処理ワークフローの各ステップの時間と温度を正確に制御するようにプログラムされています。これにより、化学物質が効果的に使用され、正確な組織病理学的診断のための高品質の処理組織が得られます。
組織処理における品質管理と化学物質管理
組織の処理に化学薬品を使用する場合、適切な品質管理が不可欠です。これらの化学物質の保管、取り扱い、廃棄などの化学物質管理に関する指導を行っています。たとえば、固定剤はその効果を維持するために適切な温度で保管する必要があります。エタノールおよびその他の可燃性脱水剤は、火気の安全な場所に保管する必要があります。
化学物質のレベルとその有効性を定期的にチェックすることも必要です。たとえば、pH の変化は固定の品質に影響を与える可能性があるため、固定液の pH を定期的に監視する必要があります。当社は、お客様が化学物質管理のベストプラクティスに確実に従うようサポートを提供し、最終的には信頼性と再現性のある組織処理結果につながります。
組織処理に適切な化学物質を選択することの重要性
組織処理に適切な化学物質を選択することは、高品質の組織切片を得るために非常に重要です。化学物質の選択を誤ると、組織の収縮、硬化、または染色結果の低下などのアーチファクトが発生する可能性があります。たとえば、過剰な固定は組織の硬化を引き起こし、切片の作成を困難にする可能性があります。一方、固定が不十分であると、細胞構造の保存が不十分になり、染色が弱くなる可能性があります。
組織処理装置のサプライヤーとして、当社は高品質の機器だけでなく、化学薬品の選択に関する専門家のアドバイスを提供することの重要性を理解しています。当社の専門家チームは、ルーチンの光学顕微鏡検査、電子顕微鏡検査、免疫組織化学のいずれであっても、お客様の特定の用途に基づいて適切な化学物質の選択をお手伝いします。
結論
要約すると、組織の処理には、それぞれ独自の機能を持つさまざまな化学物質の使用が含まれます。固定剤は組織を保存し、脱水剤は水を除去し、透明剤は組織を透明にし、包埋剤は切片作成をサポートします。当社では、これらの化学薬品と調和して機能し、高品質の組織処理を保証する最先端の組織処理装置を提供することに尽力しています。
組織加工業者をご検討中である場合、または組織加工に使用される化学物質に関する詳細情報が必要な場合は、詳細についてご相談いたしますので、お気軽にお問い合わせください。当社の経験豊富なチームは、組織学研究室にとって最適なソリューションを見つけるお手伝いをいたします。
参考文献
ヒューマソン、GL (1979)。動物組織技術 (第 4 版)。 WHフリーマン。
ジャイアン州キーナン（2008）。組織学的および組織化学的方法：理論と実践。スプリンガー。
JD バンクロフト & ギャンブル M. (2008)。組織学的技術の理論と実践。チャーチル・リビングストン。